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培養(yǎng)基研究中性粒細胞的堿性磷酸酶染色
更新時間:2014-08-01   點擊次數(shù):1018次

培養(yǎng)基研究中性粒細胞的堿性磷酸酶染色

  原理:中性粒細胞培養(yǎng)基堿性磷酸酶的顯示方法有偶氮偶聯(lián)法和鈣—鈷法兩種。前者的染色原理是血細胞內堿性磷酸酶在pH為9.4-9.6的條件下,將基質液中的α-磷酸萘酚鈉水解,產(chǎn)生α-萘酚與重氮鹽偶聯(lián)形成灰黑色沉淀,定位于細胞質內酶活性所在之處。鈣-鈷法染色是堿性磷酸酶在堿性條件下將基質液中的β-甘油磷酸鈉水解,產(chǎn)生磷酸鈉。磷酸鈉依次與硝酸鈣、硝酸鈷、硫化銨發(fā)生反應,形成不溶性棕黑色的硫化鉆,定位于酶活性之處。

  結果:磷酸醇主要存在于成熟階段的中性粒細胞(分葉核及桿狀核),其他血細胞均呈陰性反應。陽性反應為胞質中出現(xiàn)灰色到棕黑色顆粒,反應強度分為5級,即“—”、“1+”、“2+”、“3+”、“4+”。反應結果以陽性反應細胞百分率和積分值來表示。血涂片染色后,在油漫鏡下,觀察100個成熟中性粒細胞,陽性反應細胞所占百分率即為陽性率;對所有陽性反應細胞逐個按反應強度分級,將各級所占的百分率乘以級數(shù),然后相加,即為積分值。

    用于亞利桑那沙門氏菌的選擇性分離(SN標準) Salmonella Arizona Agar 亞利桑那菌瓊脂(SA)   100
培養(yǎng)基用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)(GB標準) Rappaport-Vassiliadis Mdeium 氯化鎂孔雀綠肉湯(MM,RV Medium)   250
用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)(FDA標準) Hektoen Enteric Agar HE 瓊脂(HE)   250
生化培養(yǎng)基,賴氨酸脫羧酶試驗(GB、SN標準) Lysine-decarboxylase Test Broth 賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基    5
生化培養(yǎng)基,用于細菌脲酶檢測(GB、SN標準) Urease Agar Base  尿素酶瓊脂基礎   250
加入尿素酶瓊脂基礎 40%Urea Water 40%尿素水       5ml*10
生化培養(yǎng)基,用于細菌V-P試驗(SN標準) Voges-Proskauer Semisolid Agar V-P 半固體瓊脂    250
生化培養(yǎng)基,用于細菌靛基質試驗,亦稱色氨酸肉湯(SN標準) Indole Medium 吲哚培養(yǎng)基       10
吲哚(靛基質)試驗配套試劑 Kovacs氏靛基質試劑盒 10ml*1
生化培養(yǎng)基,用于細菌丙二酸鹽利用試驗(GB、SN標準) Malonate Broth 丙二酸鈉培養(yǎng)基    10
生化培養(yǎng)基,用于細菌衛(wèi)予醇發(fā)酵試驗(SN標準) Dulcitol Semisolid Agar 衛(wèi)矛醇半固體瓊脂     10
主要用于志賀氏菌的增菌培養(yǎng),亦可用于沙門氏菌增菌培養(yǎng)(GB標準) Gram Negative Enrichment Broth GN 增菌液     250
選擇性培養(yǎng)基,主要用于分離志賀氏菌屬,亦可用于分離沙門氏菌(FDA標準) Xylose Lysine Desoxycholate Medium XLD 培養(yǎng)基       250
用于沙門氏菌的選擇性分離(GB標準) WS Salmonella Agar WS 瓊脂     250
用于志賀氏菌的葡萄糖銨試驗(GB標準) Ammonium Dextrose Medium 葡萄糖銨培養(yǎng)基   250
用于志賀氏菌的復合生化試驗(GB標準) Dextrose Semisolid Medium 葡萄糖半固體培養(yǎng)基    250
用于細菌的復合生化試驗 Motility Indol Urea Medium Base 動力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎(MIU)  250
用于硫化氫試驗 Lead Acetate Medium 醋酸鉛培養(yǎng)基   250
用于硫化氫、動力、吲哚試驗 Hydrogen Sulfide Indole Motility Medium SIM培養(yǎng)基   250

  臨床意義:培養(yǎng)基NAP活性可因年齡、性別、應激狀態(tài)、月經(jīng)周期、妊娠及分娩等因素有一定的生理性變化。在病理情況下,NAP活性的變化常有助于某些疾病的診斷和鑒別診斷。 

 

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