很多同學(xué)養(yǎng)細胞的手藝,都是從師兄師姐那里「傳承」來的,由于沒有辦法做到絕對的無菌,所以從經(jīng)驗角度出發(fā),前輩們都會告訴剛開始養(yǎng)細胞的同學(xué),可以在配制培養(yǎng)基的時候,加入1%左右的雙抗,防止細胞出現(xiàn)細菌污染(有些時候甚至出現(xiàn)離開抗生素,細胞沒過幾天立馬就被污染的情況)。
這就造成一些小伙伴在培養(yǎng)基中「預(yù)防性添加抗生素」,其實圖的就是個心安,抱著「有了抗生素就不怕污染」的心態(tài)。但事實上,抗生素并不是「免死金牌」,真菌、支原體這些污染是它不能夠?qū)沟?,甚至濫用還會適得其反。
這抗生素對細胞有什么影響呢?
早在十幾年前,就有很多報導(dǎo)指出β-內(nèi)酰胺類抗生素及氨基糖甙類抗生素,對真核細胞培養(yǎng)有抑制增殖作用[1]。并且這種抑制增殖作用在原代細胞和干細胞等難養(yǎng)細胞上尤其明顯[2-3]。2017年,加州大學(xué)Nadav Ahituv博士在Scientific Reports上發(fā)表文章,呼吁在細胞培養(yǎng)過程中減少抗生素的使用[4]。他們發(fā)現(xiàn)抗生素(雙抗:青霉素和鏈霉素)的使用影響人體肝細胞中基因表達與基因調(diào)控。其中有209個基因的表達發(fā)生了改變,特別是與藥物和應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)的基因。超過9,500個基因調(diào)控元件發(fā)生了變化,并且很多調(diào)節(jié)元件位于參與細胞分化,核酸酶活性和tRNA修飾的基因附近。雖然這些基因的數(shù)量在龐大的細胞基因庫中不值一提,但這絕對不是一個應(yīng)該被忽略的事件。
雖然抗生素對真核細胞生長的影響機制至今尚未明確,但是為了細胞更好的生長,實驗結(jié)果更加準確,實驗數(shù)據(jù)更加穩(wěn)定,在實驗過程中盡量不要隨意使用。